發(fā)文機關國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心
發(fā)文日期2024年01月12日
時效性現(xiàn)行有效
發(fā)文字號國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心通告2024年第2號
施行日期2024年01月12日
效力級別部門規(guī)范性文件
病毒清除驗證是生物制品病毒安全控制的重要保障之一，也是藥學專業(yè)技術審評的重點和難點。近年來，伴隨病毒安全控制研究的不斷深入和先驗知識的積累，采用病毒清除工藝平臺驗證進行病毒安全性評估逐步獲得認可，為推進相關配套規(guī)范性文件、技術指導原則起草制定工作，在國家藥品監(jiān)督管理局的部署下，藥審中心組織制定了《治療用重組蛋白產(chǎn)品臨床試驗申請病毒清除工藝平臺驗證技術指導原則（試行）》（見附件）。根據(jù)《國家藥監(jiān)局綜合司關于印發(fā)藥品技術指導原則發(fā)布程序的通知》（藥監(jiān)綜藥管〔2020〕9號）要求，經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局審查同意，現(xiàn)予發(fā)布，自發(fā)布之日起施行。
特此通告。
國家藥監(jiān)局藥審中心
2024年1月12日
附件:
治療用重組蛋白產(chǎn)品臨床試驗申請病毒清除工藝平臺驗證技術指導原則（試行）
一、 概述
治療用重組蛋白產(chǎn)品的病毒污染可能來自于已受污染的生產(chǎn)用原材料或生產(chǎn)過程的偶然引入，并進一步引發(fā)安全性風險。因此，病毒污染風險控制是該類產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn)過程中的質(zhì)控重點之一。生產(chǎn)工藝方面，在該類產(chǎn)品的原液生產(chǎn)過程中引入病毒清除工藝步驟，并對相關步驟的病毒清除（包括滅活和去除）性能進行評估或驗證，是病毒安全控制的重要保障措施之一。
既往，采用特定產(chǎn)品代表性批次工藝中間品和縮小模型開展驗證研究是確定實際生產(chǎn)工藝病毒清除性能有效性和穩(wěn)健性的主要途徑。近年來，伴隨病毒安全控制研究的不斷深入和先驗知識的積累，采用病毒清除工藝平臺驗證（以下簡稱平臺驗證，Platform Validation，PV）技術，對經(jīng)充分表征的治療用重組蛋白產(chǎn)品生產(chǎn)工藝進行病毒清除安全性評估的方法逐步獲得認可。本指導原則中平臺驗證系指采用已獲得的特定產(chǎn)品病毒清除工藝驗證研究內(nèi)部經(jīng)驗，適當結合外部知識，對內(nèi)部其他類似產(chǎn)品生產(chǎn)工藝中特定工藝步驟的病毒清除性能進行評估的研究方法。
本指導原則系對已實施生物制品病毒安全控制相關指導原則1-3的補充，旨在為平臺驗證的應用提出科學建議和一般性的技術要求，對具體品種的適用性應遵循具體問題具體分析的原則。隨著科學認知的深入、技術的發(fā)展和經(jīng)驗的積累，本指導原則中的相關技術要求也將逐步進行修訂和完善。
二、 適用范圍
本指導原則適用于采用哺乳動物細胞、昆蟲細胞或其他與人類具有病毒交叉感染風險的真核細胞生產(chǎn)，并使用平臺驗證替代采用特定產(chǎn)品開展病毒清除工藝驗證的治療用重組蛋白產(chǎn)品的臨床試驗申請。
三、 風險評估
1. 一般原則
采用平臺驗證的前提是申請人已經(jīng)具備充分的內(nèi)部研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗，如有必要，可適當結合文獻調(diào)研等外部知識。相較于針對特定產(chǎn)品開展的病毒清除工藝驗證研究，平臺驗證對于申請人的知識儲備和技術能力要求更高。若已開展的研究（或已積累的數(shù)據(jù)）尚不足以支持平臺驗證，則應參照相關指導原則1-3開展針對特定產(chǎn)品的病毒清除工藝驗證研究。
申請人應對臨床試驗用藥物的安全性負責，鼓勵申請人在采用平臺驗證研究進行申請前，與監(jiān)管機構進行充分地溝通交流，根據(jù)自身產(chǎn)品開發(fā)經(jīng)驗和先驗知識選擇合適的病毒清除工藝驗證方法和策略，確保受試者用藥安全。
2. 特殊考量
在平臺驗證的建立和應用中，有如下特殊考量：
應充分了解平臺驗證中特定工藝步驟的病毒清除機制及影響病毒清除效果的關鍵因素，并鼓勵采用多因素正交法對相關因素進行全面的研究和分析；
應明確產(chǎn)品（或工藝中間品）的組成，并基于風險，評估其與指示病毒間潛在的相互作用以及其對病毒清除效果產(chǎn)生的潛在影響；
充分考慮病毒清除驗證研究的一般局限性。
四、 平臺驗證的建立
充分的病毒清除驗證研究經(jīng)驗積累，科學的生產(chǎn)工藝開發(fā)和應用數(shù)據(jù)體系以及全面的內(nèi)、外部知識儲備是平臺驗證的基礎。工藝模塊是平臺驗證建立的基本單元，可以基于對已開展驗證研究數(shù)據(jù)的科學分析和匯總而建立；也鼓勵通過針對性地開展多因素正交分析所形成的數(shù)據(jù)包而建立。
平臺驗證建立的目標是確保采用所建立工藝模塊評估其他類似產(chǎn)品生產(chǎn)工藝病毒清除性能的有效性和穩(wěn)健性。平臺驗證的建立過程中，應著重從以下方面展開研究。
1. 生產(chǎn)用細胞基質(zhì)
考慮不同類型生產(chǎn)用細胞基質(zhì)在外源病毒的易感性、內(nèi)源性病毒或病毒顆粒的特征和病毒載量水平、驗證用指示病毒和病毒清除工藝評價要求等方面的差異，工藝模塊應基于采用相同細胞基質(zhì)表達并制備特定產(chǎn)品（工藝中間品）開展病毒清除驗證研究的結果而建立。
2. 指示病毒
指示病毒的種類應根據(jù)生產(chǎn)用細胞基質(zhì)和目標建立工藝模塊的工藝特點進行選擇，相同工藝模塊采用的指示病毒應保持一致。指示病毒的質(zhì)量和滴度應滿足平臺驗證的需求。
3. 產(chǎn)品（工藝中間品）
應根據(jù)特定工藝步驟中產(chǎn)品（工藝中間品）對病毒清除效果的影響，對工藝模塊建立中所使用產(chǎn)品（工藝中間品）的代表性進行充分的評估。例如，在特定條件下，建議關注低pH病毒滅活步驟中的目的蛋白濃度，或病毒截留過濾步驟中可能影響樣品粘度或微粒形成的潛在因素等。
4. 病毒清除工藝
目前，在治療用重組蛋白產(chǎn)品常用病毒清除工藝中，溶劑/去污劑病毒滅活、低pH病毒滅活和病毒截留過濾工藝被認為具有穩(wěn)健的病毒清除性能，適用于平臺驗證。基于當前對各種工藝條件的理解，對病毒清除性能具有潛在影響的重要工藝參數(shù)如表1所示。應根據(jù)所開展研究合理擬定所建立工藝模塊的工藝參數(shù)
工藝模塊 工藝參數(shù)
溶劑/去污劑種類
溶劑/去污劑病毒滅活b 溶劑/去污劑濃度
孵育時間
孵育溫度
0.2μm 過濾預處理
低pH病毒滅活c 緩沖液種類
孵育pH
孵育時間
孵育溫度
病毒截留過濾d 濾器類型
體積載量e
跨膜壓差/流速f
a.應根據(jù)所開展研究合理擬定所建立工藝模塊的工藝參數(shù)；
b.推薦的溶劑/去污劑病毒滅活條件為：（1）Triton X-100濃度≥0.5%，孵育溫度≥15°C，孵育時間≥60分鐘；（2）1% Triton X-100和0.3%磷酸三丁酯聯(lián)用，孵育時間≥30分鐘，或1%聚山梨酯80和0.3%磷酸三丁酯聯(lián)用，孵育時間≥6小時，孵育溫度≥23°C。當超出以上范圍或采用新的溶劑/去污劑時，應開展產(chǎn)品特異性的驗證研究或提供更為充分的研究數(shù)據(jù)以支持臨床試驗申請；
c.推薦的低pH病毒滅活條件為孵育pH≤3.6, 孵育溫度≥15°C，孵育時間≥30分鐘，氯化鈉濃度≤500 mmol/L。當超出以上范圍時，應開展產(chǎn)品特異性的驗證研究或提供更為充分的研究數(shù)據(jù)以支持臨床試驗申請；
d.該工藝后應滿足濾器完整性測試并符合要求，并考慮工藝中斷（包括在過濾期間或在從產(chǎn)品中間體過濾切換到過濾器沖洗時發(fā)生）對截留性能的影響；
e.包括病毒過濾器加載產(chǎn)品中間體的體積載量以及沖洗過濾器用緩沖液的體積載量；
f.應根據(jù)所使用濾器品牌、型號的不同確定相應最差條件。
5. 數(shù)據(jù)要求及檢測方法
工藝模塊應基于充分的案例或多因素正交分析數(shù)據(jù)而建立，具體數(shù)量應根據(jù)所擬定工藝參數(shù)的范圍或組合的復雜程度確定。對于已充分表征的重組蛋白產(chǎn)品，如單克隆抗體，可基于3-5個具有相似特征屬性和相似工藝生產(chǎn)的特定產(chǎn)品的驗證研究結果建立工藝模塊。相同工藝模塊的病毒清除效果研究中建議采用原理（如基于細胞的檢定或基于核酸的檢定）相同的檢定方法。病毒檢測方法應參照《中國藥典》或國際通行的技術指導原則等規(guī)范性文件執(zhí)行。
各工藝模塊的病毒對數(shù)降低值應取各案例或正交分析獲得的最差結果計；同時，僅下降因子≥4 logs的步驟可認定為有效步驟，下降因子≥1 log的步驟可納入工藝總體安全限度的計算。
五、 平臺驗證的應用
平臺驗證的應用是指利用經(jīng)驗證的、具有穩(wěn)健病毒清除性能的工藝模塊，對擬申請產(chǎn)品制備工藝過程中特定工藝步驟的病毒清除性能進行評估的過程。應用平臺驗證前，應對工藝模塊相較于擬申請產(chǎn)品和生產(chǎn)工藝的代表性進行充分的評估?？刹捎靡粋€或多個具有代表性的工藝模塊支持臨床研究的開展。
平臺驗證應用的技術要求與平臺驗證建立階段的技術要求基本一致。對于特定工藝步驟中所擬定的影響病毒清除性能的重要工藝參數(shù)應不超出對應工藝模塊的最差條件，并對其它工藝參數(shù)進行對比，以確?？s小模型的適用性。當在病毒截留過濾工藝步驟采用平臺驗證時，應至少采用細小病毒作為指示病毒，進行一次特定產(chǎn)品的確認驗證研究。
六、 名詞解釋
平臺驗證：指采用類似產(chǎn)品病毒清除工藝驗證研究的內(nèi)部經(jīng)驗，適當結合外部知識，對內(nèi)部其他類似產(chǎn)品生產(chǎn)工藝中特定工藝步驟的病毒清除性能進行評估的研究方法。
工藝模塊：用于支持平臺驗證中，對特定工藝步驟病毒清除效果開展評估的模型。
工藝穩(wěn)健性：指工藝執(zhí)行過程中，原材料或生產(chǎn)工藝參數(shù)的適度變化不會對該工藝的病毒清除性能產(chǎn)生影響。
病毒清除：包括病毒去除和病毒滅活兩種不同的病毒清除方法。
病毒去除：采用物理方法將病毒顆粒從產(chǎn)品中分離。
病毒滅活：采用物理或化學方法使病毒失去感染性。
工藝中間品：在生產(chǎn)過程中收集并用于特定工藝步驟病毒清除性能驗證研究的樣品。
特異性相互作用：產(chǎn)品或工藝中間品與病毒之間發(fā)生可能改變其物理狀態(tài)的行為。
